Instrumentation and Applications of fluorimetry - Instrumental Methods of Analysis B. Pharma 7th Semester

ఫ్లోరిమెట్రీ యొక్క ఇన్స్ట్రుమెంటేషన్ మరియు అప్లికేషన్స్

లక్ష్యాలు

సెషన్ ముగింపులో విద్యార్థి చేయగలరు

• స్పెక్ట్రో-ఫ్లోరోమీటర్‌లోని వివిధ భాగాలను గుర్తించండి

• భాగాలను వర్గీకరించండి

• ఫ్లోరిమీటర్ నిర్మాణం మరియు పనిని వివరించండి

• ఫ్లోరిమెట్రీ యొక్క అనువర్తనాలను వివరించండి

వాయిద్యం :

• కాంతి మూలం

• ఫిల్టర్లు మరియు మోనోక్రోమేటర్లు

• నమూనా కణాలు

• డిటెక్టర్లు

కాంతి మూలం:

• మెర్క్యురీ ఆర్క్ దీపం.

• జినాన్ ఆర్క్ దీపం.

• టంగ్స్టన్ దీపం.

• ట్యూనబుల్ డై లేజర్‌లు.

మెర్క్యురీ ఆర్క్ దీపం:

• 350nm పైన తీవ్రమైన లైన్ స్పెక్ట్రమ్‌ను ఉత్పత్తి చేయండి.

• అధిక పీడన దీపాలు 366, 405, 436, 546, 577, 691, 734nm వద్ద పంక్తులు ఇస్తాయి.

• తక్కువ పీడన దీపాలు 254nm వద్ద అదనపు రేడియేషన్‌ను అందిస్తాయి.

జినాన్ ఆర్క్ లాంప్:

• జినాన్ వాతావరణం ద్వారా కరెంట్ ప్రసరించడం ద్వారా తీవ్రమైన రేడియేషన్ .

• స్పెక్ట్రమ్ 250-600nm కంటే ఎక్కువ పరిధిలో నిరంతరంగా ఉంటుంది, గరిష్ట తీవ్రత 470nm.

టంగ్స్టన్ దీపం:

• దీపం యొక్క తీవ్రత తక్కువగా ఉంటుంది.

• కనిపించే ప్రాంతంలో ఉత్తేజితం చేస్తే ఈ దీపం ఉపయోగించబడుతుంది.

• ఇది UV రేడియేషన్‌ను అందించదు.

ట్యూనబుల్ డై లేజర్‌లు:

• ప్రాథమిక వనరుగా పల్సెడ్ నైట్రోజన్ లేజర్.

• 360 మరియు 650 nm మధ్య రేడియేషన్ ఉత్పత్తి అవుతుంది.

ఫిల్టర్లు మరియు మోనోక్రోమేటర్లు:

ఫిల్టర్లు

• ప్రాథమిక వడపోత- కాంతి యొక్క ఉత్తేజిత తరంగదైర్ఘ్యాన్ని ప్రసారం చేస్తుంది.

• సెకండరీ ఫిల్టర్- ఫ్లోరోసెంట్ కాంతిని ప్రసారం చేస్తుంది.

మోనోక్రోమేటర్స్

• ఉత్తేజిత మోనోక్రోమేటర్లు-అణువు ద్వారా శోషించబడిన రేడియేషన్‌ను మాత్రమే వేరు చేస్తుంది.

• ఉద్గార మోనోక్రోమేటర్లు-అణువు ద్వారా విడుదలయ్యే రేడియేషన్‌ను మాత్రమే వేరు చేస్తాయి.

నమూనా హోల్డర్లు:

• మెజారిటీ ఫ్లోరోసెన్స్ పరీక్షలు ద్రావణంలో నిర్వహించబడతాయి.

• ఉపయోగించిన సిలికా లేదా గాజుతో తయారు చేయబడిన స్థూపాకార లేదా దీర్ఘచతురస్రాకార కణాలు.

• మార్గం పొడవు సాధారణంగా 10mm లేదా 1cm.

• నమూనా హోల్డర్ యొక్క అన్ని ఉపరితలాలు ఫ్లోరిమెట్రీలో పాలిష్ చేయబడతాయి.

డిటెక్టర్లు:

• ఫోటోవోల్టాయిక్ సెల్

• ఫోటో ఎమిసివ్ సెల్

• ఫోటోమల్టిప్లైయర్ గొట్టాలు

• డయోడ్లు - ఉత్తమ మరియు ఖచ్చితమైన.

ఫోటోమల్టిప్లియర్ ట్యూబ్:

• రేడియేషన్ యొక్క ద్వితీయ ఉద్గారాల ద్వారా ఫోటో ఎలక్ట్రాన్ల గుణకారం.

• ఫోటో కాథోడ్ మరియు డైనోడ్‌ల శ్రేణి ఉపయోగించబడుతుంది.

• ప్రతి కాథోడ్ మునుపటి కంటే 75-100v ఎక్కువ వద్ద నిర్వహించబడుతుంది.

• మొత్తం మీద 106 యాంప్లిఫికేషన్ పొందబడింది.

ఇన్స్ట్రుమెంట్స్ డిజైన్స్:

• సింగిల్ బీమ్ ఫ్లోరిమీటర్

• డబుల్ బీమ్ ఫ్లోరిమీటర్

• స్పెక్ట్రోఫ్లోరిమీటర్ (డబుల్ బీమ్)

సింగిల్ బీమ్ ఫ్లోరిమీటర్

• టంగ్స్టన్ దీపం కాంతికి మూలం.

• ప్రాధమిక వడపోత ఒక ఇరుకైన శ్రేణి ఉత్తేజిత రేడియేషన్‌ను ప్రసారం చేస్తుంది.

• సెకండరీ ఫిల్టర్ ద్వారా విడుదలైన రేడియేషన్ 90 ^{o వద్ద కొలుస్తారు.}

• సెకండరీ ఫిల్టర్ ఉద్గార రేడియేషన్ యొక్క ఇరుకైన పరిధిని ప్రసారం చేస్తుంది.

ప్రయోజనాలు:

• నిర్మాణంలో సింపుల్

• ఉపయోగించడానికి సులభం.

• ఆర్థికపరమైన

ప్రతికూలతలు:

• ఒక సమయంలో సూచన పరిష్కారం & నమూనా పరిష్కారం ఉపయోగించడం సాధ్యం కాదు.

• సమ్మేళనం యొక్క ఎగ్జిటేషన్ & ఎమిషన్ స్పెక్ట్రమ్‌ను పొందేందుకు వేగవంతమైన స్కానింగ్ సాధ్యం కాదు.

డబుల్ బీమ్ ఫ్లోరిమీటర్:

• సింగిల్ బీమ్ పరికరం వలె ఉంటుంది.

• కాంతి మూలం నుండి రెండు సంఘటన కిరణాలు విడిగా ప్రాథమిక ఫిల్టర్‌ల గుండా వెళతాయి మరియు నమూనా లేదా సూచన పరిష్కారంపై పడతాయి.

• నమూనా లేదా సూచన నుండి వెలువడే రేడియేషన్ ద్వితీయ వడపోత ద్వారా విడిగా వెళుతుంది.

ప్రయోజనాలు:

• నమూనా & సూచన పరిష్కారాన్ని ఏకకాలంలో విశ్లేషించవచ్చు.

ప్రతికూలత

• ఫిల్టర్‌లను ఉపయోగించడం వల్ల వేగంగా స్కానింగ్ చేయడం సాధ్యం కాదు .

స్పెక్ట్రోఫ్లూరిమీటర్ :

• డబుల్ బీమ్ ఫ్లోరిమీటర్‌లోని ప్రాథమిక వడపోత ఉద్దీపన మోనోక్రోమేటర్‌లచే భర్తీ చేయబడుతుంది.

• ద్వితీయ వడపోత ఉద్గార మోనోక్రోమేటర్లచే భర్తీ చేయబడింది.

• సంఘటన పుంజం బీమ్ స్ప్లిటర్‌ని ఉపయోగించి నమూనా మరియు సూచన పుంజంగా విభజించబడింది.

• డిటెక్టర్ ఫోటోమల్టిప్లియర్ ట్యూబ్.

ప్రయోజనాలు

• ఎక్సైటేషన్ & ఎమిషన్ స్పెక్ట్రమ్‌ని పొందడానికి వేగవంతమైన స్కానింగ్.

• ఫిల్టర్ ఫ్లోరిమీటర్‌తో పోల్చినప్పుడు మరింత సున్నితమైన మరియు ఖచ్చితమైనది.

ఫ్లోరోమీటర్ యొక్క స్కీమాటిక్ రేఖాచిత్రం:

స్పెక్ట్రోఫ్లోరిమీటర్ యొక్క స్కీమాటిక్ రేఖాచిత్రం

అప్లికేషన్లు

• అకర్బన పదార్థాల నిర్ధారణ

• ఇతర ప్లాటినం లోహాల సమక్షంలో రుథేనియం అయాన్ల నిర్ధారణ.

• మిశ్రమాలలో అల్యూమినియం (III) యొక్క నిర్ధారణ.

• బెంజోయిన్‌తో ఏర్పడిన కాంప్లెక్స్ ద్వారా ఉక్కులో బోరాన్ యొక్క నిర్ధారణ.

• టార్టరేట్ సమక్షంలో 2-(2 హైడ్రాక్సీఫెనిల్) బెంజోక్సాజోల్‌తో కాడ్మియం అంచనా .

• అణు పరిశోధన

• యురేనియం లవణాల క్షేత్ర నిర్ధారణ.

• ఫ్లోరోసెంట్ సూచికలు

• యాసిడ్-బేస్ టైట్రేషన్‌లో ప్రధానంగా ఉపయోగించబడుతుంది.

ఉదా: ఇయోసిన్: రంగులేని-ఆకుపచ్చ.

ఫ్లోరోసెసిన్: రంగులేని-ఆకుపచ్చ.

క్వినైన్ సల్ఫేట్: నీలం-వైలెట్.

అక్రిడిన్: ఆకుపచ్చ-వైలెట్

4] ఫ్లోరిమెట్రిక్ కారకాలు

• రెండు లేదా అంతకంటే ఎక్కువ దాత ఫంక్షనల్ గ్రూపులతో సుగంధ నిర్మాణం

కారకం

అయాన్

ఫ్లోరోసెన్స్ తరంగదైర్ఘ్యం

సున్నితత్వం

అలిజారిన్ గార్నెట్ బి

అల్ ³⁺

500

0.007

ఫ్లావనోల్

8-హైడ్రాక్సీ

క్వినోలిన్

Sn ⁴⁺

లి ²⁺

470

580

0.1

0.2

• సేంద్రీయ విశ్లేషణ

• సిగరెట్ పొగ, వాయు కాలుష్య కారకాలు, ఆటోమొబైల్ ఎగ్జాస్ట్‌లు మొదలైన వాటిలో ఉండే సేంద్రీయ సుగంధ సమ్మేళనాల గుణాత్మక మరియు పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ.

• ఫార్మాస్యూటికల్ విశ్లేషణ

సమ్మేళనం	కారకం	ఉత్తేజిత తరంగదైర్ఘ్యం	ఫ్లోరోసెన్స్
హైడ్రోకార్టిసోన్	ఇథనాల్‌లో 75%v/v H ₂ SO ₄	460	520
నికోటినామైడ్	సైనోజెన్ క్లోరైడ్	250	430