Thin Layer Chromatography - Instrumental Methods of Analysis B. Pharma 7th Semester

సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ

కంటెంట్‌లు

•       సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ

•       చరిత్ర

•       సూత్రం ప్రమేయం

•       TLC యొక్క అప్లికేషన్లు

TLC యొక్క ఆచరణాత్మక అవసరాలు

•       నిశ్చల దశ

•       గ్లాస్ ప్లేట్లు

•       TLC ప్లేట్ల తయారీ మరియు క్రియాశీలత

•       నమూనా యొక్క అప్లికేషన్

లక్ష్యాలు

ఈ సెషన్ ముగిసే సమయానికి, విద్యార్థులు వీటిని చేయగలరు:

Ø  థిన్ లేయర్ క్రోమాటోగ్రఫీలో ఉన్న సూత్రాన్ని వివరించండి

Ø  TLC యొక్క భాగాలను వివరించండి

Ø  TLC ప్లేట్ల తయారీ మరియు క్రియాశీలతను చర్చించండి

సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ

చరిత్ర

•       1938లో, ఇజ్మైలోవ్ మరియు ష్రైబర్ గ్లాస్ ప్లేట్‌పై 2 మిమీ మందం మరియు దృఢమైన అల్యూమినా పొరను ఉపయోగించి మొక్కల సారాలను వేరు చేశారు.

•       1944లో, కాన్స్డెన్, గోర్డెన్ మరియు మార్టిన్ అమైనో ఆమ్లాలను వేరు చేయడానికి ఫిల్టర్ పేపర్‌లను ఉపయోగించారు.

•       1950లో, కిర్చ్నర్ ఫిల్టర్ పేపర్‌పై టెర్పెన్‌లను గుర్తించాడు మరియు

•       తరువాత అల్యూమినాతో పూసిన గ్లాస్ ఫైబర్ పేపర్

•       1958లో, స్టాల్ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా విశ్లేషించడానికి ప్రామాణిక పరికరాలను అభివృద్ధి చేశాడు

సూత్రం

•       విభజన సూత్రం అధిశోషణం

•       క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్‌పై పూసిన యాడ్సోర్బెంట్ యొక్క పలుచని పొరపై ఒకటి లేదా అంతకంటే ఎక్కువ సమ్మేళనాలు గుర్తించబడతాయి.

•       కేశనాళిక చర్య (గురుత్వాకర్షణ శక్తికి వ్యతిరేకంగా) కారణంగా మొబైల్ దశ ద్రావకం ద్వారా ప్రవహిస్తుంది

•       భాగాలు యాడ్సోర్బెంట్ వైపు వాటి అనుబంధాల ప్రకారం కదులుతాయి

•       నిశ్చల దశ పట్ల ఎక్కువ అనుబంధం ఉన్న భాగం నెమ్మదిగా కదులుతుంది

•       తక్కువ అనుబంధం వేగంగా కదులుతుంది

•       భాగాలు నిశ్చల దశ పట్ల అనుబంధం ఆధారంగా పలుచని పొర క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్లేట్‌పై వేరు చేయబడతాయి

TLC యొక్క ప్రయోజనాలు

•       సాధారణ పద్ధతి మరియు పరికరాల ధర తక్కువగా ఉంటుంది

•       రాపిడ్ టెక్నిక్ మరియు కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ వంటి సమయం తీసుకోదు

•       పదార్ధం యొక్క µg విభజన సాధించవచ్చు

•       ఏ రకమైన సమ్మేళనమైనా విశ్లేషించవచ్చు

•       విభజన యొక్క సామర్థ్యం- విభజన యొక్క సామర్థ్యాన్ని పెంచడానికి చాలా చిన్న కణ పరిమాణాన్ని ఉపయోగించవచ్చు

•       గుర్తించడం సులభం మరియు శ్రమతో కూడుకున్నది కాదు

•       సన్నని పొర యొక్క సామర్థ్యాన్ని మార్చవచ్చు

•       విశ్లేషణాత్మక మరియు సన్నాహక విభజనలు చేయవచ్చు

•       తినివేయు స్ప్రే రియాజెంట్లను ప్లేట్లను పాడుచేయకుండా ఉపయోగించవచ్చు

•       కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీతో పోల్చినప్పుడు ప్రతి విభజనకు తక్కువ ద్రావకం, స్థిరమైన దశ మరియు సమయం అవసరం

ప్రాక్టికల్ అవసరాలు

•       నిశ్చల దశ

•       గ్లాస్ ప్లేట్లు

•       TLC ప్లేట్ల తయారీ మరియు క్రియాశీలత

•       నమూనా యొక్క అప్లికేషన్

•       అభివృద్ధి ట్యాంక్

•       మొబైల్ దశ

•       అభివృద్ధి సాంకేతికత

•       ఏజెంట్లను గుర్తించడం లేదా దృశ్యమానం చేయడం

నిశ్చల దశ

•       అనేక యాడ్సోర్బెంట్లను స్థిర దశగా ఉపయోగించవచ్చు

•       స్లర్రీని ఏర్పరచడానికి వాటిని నీరు లేదా ద్రావకాలతో కలపవలసిన కూర్పు మరియు నిష్పత్తి

పేరు	కూర్పు	యాడ్సోర్బెంట్: నీటి నిష్పత్తి
సిలికా జెల్ హెచ్	బైండర్ లేకుండా సిలికా జెల్	1 : 1.5
సిలికా జెల్ జి	సిలికా జెల్ + కాల్షియం సల్ఫేట్	1 : 2
సిలికా జెల్ GF	సిలికా జెల్ + బైండర్ + ఫ్లోరోసెంట్ సూచిక	1 : 2
అల్యూమినా తటస్థ ప్రాథమిక యాసిడ్	బైండర్ లేకుండా Al 2 O 3	1: 1.1
సెల్యులోజ్ పొడి	బైండర్తో సెల్యులోజ్ బైండర్ లేకుండా సెల్యులోజ్	1 : 6 1 : 5

గ్లాస్ ప్లేట్లు

•       20 cm x 20 cm (పూర్తి ప్లేట్) వంటి నిర్దిష్ట కొలతలు

•       20 సెం.మీ x 10 సెం.మీ (సగం ప్లేట్)

•       20 సెం.మీ x 5 సెం.మీ (క్వార్టర్ ప్లేట్)

•       వాణిజ్యపరంగా అందుబాటులో ఉన్న TLC స్ప్రెడర్ వెడల్పు 20 సెం.మీ

•       TLC స్ప్రెడర్‌ని ఉపయోగించకుండా వివిధ పరిమాణాల ప్లేట్‌లను సిద్ధం చేయవచ్చు

•       రసాయన ప్రతిచర్య పురోగతిని పర్యవేక్షించడం వంటి కొన్ని అనువర్తనాల కోసం మైక్రోస్కోపిక్ స్లయిడ్‌లను కూడా ఉపయోగించవచ్చు

•       అభివృద్ధి సమయం 5 నిమిషాల కంటే చాలా తక్కువ

•       గ్లాస్ ప్లేట్లు మంచి నాణ్యత కలిగి ఉండాలి మరియు ప్లేట్‌లను ఎండబెట్టడానికి ఉపయోగించే ఉష్ణోగ్రతలను తట్టుకోవాలి 

TLC ప్లేట్ల తయారీ మరియు క్రియాశీలత

•       నిశ్చల దశ మరియు నీటి మిశ్రమం అయిన స్లర్రీని ముందుగా పేర్కొన్న నిష్పత్తిని ఉపయోగించి తయారు చేస్తారు

•       స్లర్రీని సిద్ధం చేసిన తర్వాత, TLC ప్లేట్‌లను ఏదైనా టెక్నిక్ ద్వారా తయారు చేయవచ్చు

పోయడం

•       స్లర్రీని తయారు చేసి, సమం చేయబడిన ఉపరితలంపై నిర్వహించబడే గాజు పలకపై పోస్తారు

•       గ్లాస్ ప్లేట్ ఉపరితలంపై స్లర్రీ ఏకరీతిగా వ్యాపించి ఉంటుంది

•       ప్లేట్లు ఓవెన్లో ఎండబెట్టబడతాయి

•       లోపం ఏమిటంటే మందంలో ఏకరూపత నిర్ధారించబడదు

ముంచడం

•       రెండు ప్లేట్లు స్లర్రీలో ముంచి, స్లర్రింగ్ నుండి తీసివేసిన తర్వాత వేరు చేయబడతాయి మరియు ఎండబెట్టబడతాయి

•       లోపం ఏమిటంటే తక్కువ ప్లేట్‌లను సిద్ధం చేయడానికి కూడా పెద్ద మొత్తంలో స్లర్రీ అవసరం

చల్లడం

•       ఒక గుడ్డపై పెర్ఫ్యూమ్ స్ప్రేని ఉపయోగించడాన్ని పోలి ఉంటుంది

•       యాడ్సోర్బెంట్ లేదా స్లర్రి సస్పెన్షన్ ఒక స్ప్రేయర్ ఉపయోగించి ఒక గాజు ప్లేట్ మీద స్ప్రే చేయబడుతుంది

•       లోపం ఏమిటంటే పొర మందాన్ని ప్లేట్‌లో ఒకే విధంగా నిర్వహించడం సాధ్యం కాదు

వ్యాపించడం

•       TLC స్ప్రెడర్‌ని ఉపయోగించే ఉత్తమ సాంకేతికత

•       నిర్దిష్ట కొలతలు (20 cm x 20 cm/ 10 cm / 5 cm) గల గ్లాస్ ప్లేట్లు బేస్ ప్లేట్‌పై పేర్చబడి ఉంటాయి.

•       తయారీ తర్వాత స్లర్రీని TLC స్ప్రెడర్ యొక్క రిజర్వాయర్ లోపల పోస్తారు

•       స్ప్రెడర్‌లో నాబ్‌ని ఉపయోగించడం ద్వారా యాడ్సోర్బెంట్ పొర యొక్క మందం సర్దుబాటు చేయబడుతుంది

•       సాధారణంగా 0.25 మిమీ మందం విశ్లేషణాత్మక ప్రయోజనం కోసం ఉపయోగించబడుతుంది

•       సన్నాహక ప్రయోజనం కోసం 2 mm మందం

•       స్ప్రెడర్ ప్లేట్‌లపై ఒక్కసారి మాత్రమే చుట్టబడుతుంది

ప్లేట్లు యాక్టివేషన్

•       ప్లేట్లు సెట్ చేయడానికి అనుమతించబడతాయి (గాలి ఎండబెట్టడం)

•       యాడ్సోర్బెంట్ ఉపరితలంపై పగుళ్లను నివారించడానికి పూర్తయింది

•       1 గంట పాటు 100 ⁰ C నుండి 120 ⁰ C వరకు ఓవెన్‌లో ఉంచడం ద్వారా ప్లేట్లు సక్రియం చేయబడతాయి.

TLC ప్లేట్ల సక్రియం

•       నీరు/ తేమ మరియు ఇతర శోషక పదార్థాలను తొలగించడం తప్ప మరేమీ లేదు

•       అధిక ఉష్ణోగ్రతల వద్ద వేడి చేయడం ద్వారా

•       యాక్టివేటెడ్ ప్లేట్‌లను థర్మోస్టాటిక్‌గా నియంత్రించబడే ఓవెన్‌లో లేదా డెసికేటర్‌లో నిల్వ చేయవచ్చు

•       అవసరమైనప్పుడు వాడతారు

నమూనా యొక్క అప్లికేషన్

•       మంచి మచ్చలు పొందడానికి, నమూనా లేదా ప్రామాణిక పరిష్కారం యొక్క ఏకాగ్రత కనిష్టంగా ఉండాలి

•       1% ద్రావణంలో 2-5 µl కేశనాళిక గొట్టం లేదా మైక్రోపిపెట్ ఉపయోగించి గుర్తించబడుతుంది

•       గుర్తులతో కూడిన టెంప్లేట్‌ని ఉపయోగించడం ద్వారా మచ్చలు ఒకదానికొకటి యాదృచ్ఛికంగా లేదా సమాన దూరంలో ఉంచబడతాయి

•       మచ్చలు ప్లేట్ యొక్క బేస్ పైన కనీసం 2 సెం.మీ

•       డెవలప్‌మెంట్ ట్యాంక్‌లోని మొబైల్ ఫేజ్‌లో స్పాటింగ్‌ను ముంచకూడదు

•       క్వార్టర్ ప్లేట్‌లో (20 సెం.మీ x 5 సెం.మీ) కనీసం 4 మచ్చలను సౌకర్యవంతంగా గుర్తించవచ్చు.

సారాంశం

•       1958లో, స్టాల్ సన్నని పొర క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా విశ్లేషించడానికి ప్రామాణిక పరికరాలను అభివృద్ధి చేశాడు

•       కేశనాళిక చర్య (గురుత్వాకర్షణ శక్తికి వ్యతిరేకంగా) కారణంగా మొబైల్ దశ ద్రావకం ద్వారా ప్రవహిస్తుంది

•       భాగాలు యాడ్సోర్బెంట్ వైపు వాటి అనుబంధాల ప్రకారం కదులుతాయి

•       విభజన యొక్క సామర్థ్యాన్ని పెంచడానికి చాలా చిన్న కణ పరిమాణాన్ని ఉపయోగించవచ్చు

•       కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీతో పోల్చినప్పుడు ప్రతి విభజనకు తక్కువ ద్రావకం, స్థిరమైన దశ మరియు సమయం అవసరం

•       గ్లాస్ ప్లేట్లు మంచి నాణ్యత కలిగి ఉండాలి మరియు ప్లేట్‌లను ఎండబెట్టడానికి ఉపయోగించే ఉష్ణోగ్రతలను తట్టుకోవాలి 

•       1 గంట పాటు 100 ⁰ C నుండి 120 ⁰ C వరకు ఓవెన్‌లో ఉంచడం ద్వారా ప్లేట్లు సక్రియం చేయబడతాయి.

 PDF గమనికల కోసం డౌన్‌లోడ్ బటన్‌పై క్లిక్ చేయండి